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      如何處理IGF-1試劑盒的樣本

      2019-08-09 瀏覽次數:2217

        IGF-1試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、猴、兔、豬、馬、魚(yú)、雞、鴨、羊等等;樣本包括血清、血漿、尿液、細胞培養上清、組織標本等。如何處理IGF-1試劑盒的樣本:
        1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如出現沉淀,應再次離心。
        2.血漿:應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
        3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
        4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
        5.組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
        不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的IGF-1試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照說(shuō)明書(shū)嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結果的不確定性,反應時(shí)間的誤差,做大量標本時(shí),孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。臨界值附近標本波動(dòng)為正?,F象,任何試劑均不可避免,可以考慮將標本做奇數次復檢。加樣時(shí)樣品量誤差,對于陰或很陽(yáng)的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,建議校對加樣器。

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