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如何處理IGF-1試劑盒的樣本
2019-08-09 瀏覽次數：2217
IGF-1試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、猴、兔、豬、馬、魚(yú)、雞、鴨、羊等等；樣本包括血清、血漿、尿液、細胞培養上清、組織標本等。如何處理IGF-1試劑盒的樣本：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過(guò)程中如出現沉淀，應再次離心。
2.血漿：應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。
3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。
5.組織標本：切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的IGF-1試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照說(shuō)明書(shū)嚴格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結果的不確定性，反應時(shí)間的誤差，做大量標本時(shí)，孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。臨界值附近標本波動(dòng)為正?，F象，任何試劑均不可避免，可以考慮將標本做奇數次復檢。加樣時(shí)樣品量誤差，對于陰或很陽(yáng)的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響極大，建議校對加樣器。
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