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激素ELISA試劑盒是如何鑒定的呢？
2023-07-23 瀏覽次數：453
無(wú)論做什么都是熟能生巧，ELISA實(shí)驗自然也是如此，其中的操作技術(shù)是需要充分的文字了解與反復實(shí)踐的。的試劑，良好狀態(tài)的儀器，排除各種影響因素的干擾和正確操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。
本文講一講激素ELISA試劑盒如何鑒定抗體。
1、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高，它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn)，計算各自的結合率，求出各自在IC50時(shí)的濃度，并按下列公式計算交叉反應率。交叉反應率=IC50時(shí)抗原濃度(Y)/IC50近似抗原物質(zhì)的濃度(Z)X100%。如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí)，表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0，即該血清的特異性較好。
2、抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較價(jià)。不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多，包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法，以資比較。如制備抗抗體的效價(jià)，一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
3、抗體的親和力鑒定：抗體的親和力是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在108～1010/mol，也有多達1014/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗證抗體的均一性等均有重要意義。
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