技術(shù)文章 / article
激素ELISA試劑盒標本出現問(wèn)題的原因有哪些
2019-07-26 瀏覽次數：1583
ELISA實(shí)驗開(kāi)始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線(xiàn)。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測范圍。使用激素ELISA試劑盒過(guò)后標本的保存非常重要，保存不當容易出現溶血、凝集不全、受細菌污染等現象。主要有哪些原因引起的呢？
標本管中添加物質(zhì)的影響：抗凝劑、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。
標本保存不當：在冰箱中保存過(guò)久的標本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體，在間接法ELISA測定中會(huì )導致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性；標本放置時(shí)間過(guò)長(cháng)（如一天以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現假陰性。為克服上述干擾，ELISA測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5天內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應充分混合后再測定，但混勻時(shí)應輕柔，不可強烈振蕩。
標本溶血：由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為標記的ELISA測定中，會(huì )導致非特異性顯色，ELISA試劑盒干擾測定結果。為克服上述干擾作用，標本采集時(shí)必須注意避免溶血。
標本受細菌污染：因菌體中可能含有內源性辣根過(guò)氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結果。
標本凝集不全：在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固，18~24h*凝固。臨床檢驗工作中，有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強行離心分離血清，此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在激素ELISA試劑盒測定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結果；這類(lèi)情況于次日復查時(shí)因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復查結果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用，解決的辦法是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
產(chǎn)品搜索
產(chǎn)品分類(lèi)
聯(lián)系我們
聯(lián)系人：李小姐
電話(huà)/傳真：13366128764
手機：13391706382
地址：北京市海淀區廂黃旗2號樓1層4-179室
電話(huà)/傳真：13366128764
手機：13391706382
地址：北京市海淀區廂黃旗2號樓1層4-179室